Đo hoạt độ amylase – dịch chọc dò

NGUYÊN LÝ

Amylase thủy phân 2-chloro-4-nitrophenyl-maltotriosid (CNPG₃) thành 2- chloro-4-nitrophenol (CNP), 2-chloro-4-nitrophenyl-maltodiosid và glucose (G):

               Amylase

5 CNPG₃ —————-> 3 CNP + 2 CNPG₂ + 3 G₃ + 2 G

Sự giải phóng của CNP từ cơ chất và sự tăng độ hấp thụ ở bước ống 415 nm của nó tỷ lệ thuận với hoạt độ mylase trong mẫu thử.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Bác sĩ và kỹ thuật viên được đào tạo chuyên ngành xét nghiệm hóa sinh.

Phương tiện, hóa chất

Máy xét nghiệm bán tự động H5000, 4010, evolution…

Máy tự động hoàn toàn AU 400, 640, 2700 (hãng Beckman coulter). Kit thuốc thử amylase (hãng Becman coulter).

Người bệnh

Người bệnh cần được giải thích về việc làm xét nghiệm.

Phiếu xét nghiệm

Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ các thủ tục hành chính: họ tên người bệnh, tuổi, mã số người bệnh, khoa phòng, tên xét nghiệm chỉ định, khoảng tham chiếu, bác sĩ chỉ định xét nghiệm, ngày giờ lấy mẫu, người lấy mẫu, ngày giờ nhận mẫu bệnh phẩm, người nhận mẫu.

Ghi yêu cầu xét nghiệm: Xác định hoạt độ mylase trong dịch.

CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Lấy bệnh phẩm

Định lượng mylase các dịch cần ly tâm thu lấy dịch trong để định lượng.

Tiến hành kỹ thuật

Cho vào 3 ống nghiệm

Lắc đều, ủ 37⁰C trong 5 phút hoặc 10 phút ở nhiệt độ phòng. Đo mật độ quang học ở bước sóng 340 nm so với ống chuẩn để tính kết quả.

Tính kết quả:

Nồng độ ống mẫu: C_U = OD_U/ OD_S * C_S (U/l)

OD_U là mật độ hấp thu của ống mẫu

OD_S là mật độ hấp thu của ống chuẩn

C_U là hoạt độ mylase mẫu

C_S là hoạt độ mylase chuẩn

Chú ý: Có thể tiến hành trên máy bán tự động Stat Fax đã cài đặt chương trình như trên. Khi làm, đo mật độ quang của ống trắng trước. Sau đó đưa vào ống chuẩn máy sẽ tự động đo và tính ra hệ số. Tiếp đó đưa theo thứ tự các ống thử vào máy sẽ tự động đo và tính ra kết quả hiện trên máy hoặc in ra giấy.

NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Giá trị tham khảo: Chưa có giá trị tham khảohoạt độ amylase trong dịch

Hoạt độ amylase huyết thanh:

Hoạt độ amylase nước tiểu:

NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ