PHÂN LẬP TẾ BÀO GỐC
TỪ DỊCH HÚT TỦY XƯƠNG BẰNG MÁY COMTEC
(Bone marrow stem cell isolation using COMTEC apheresis system)
NGUYÊN LÝ
Các thành phần trong dịch hút tủy xương có tỷ trọng và độ nhớt khác nhau nên khi ly tâm sẽ phân tách thành các lớp khác nhau. Máy Comtec sẽ ly tâm dịch tủy xương để thu nhận lớp có chứa tế bào gốc và loại bỏ phần lớn hồng cầu, tiểu cầu, plasma, mảnh xương vụn… khỏi dịch hút tủy xương.
Nguồn gốc kỹ thuật: Theo quy trình hướng dẫn của máy và AABB.
CHỈ ĐỊNH
Dịch tủy xương sau khi thu thập.
CHỐNG CHỈ ĐỊNH
Không có chống chỉ định.
CHUẨN BỊ
Người thực hiện:
Được đào tạo để thực hiện kỹ thuật.
Phương tiện – Hóa chất:
Phương tiện:
Bộ kít phân lập tế bào gốc từ dịch tủy xương (P1Y + BMSC);
Túi dung dịch chống đông ACD – A 600ml;
Quần áo vô trùng, mũ, khẩu trang, ủng giấy;
Bơm tiêm 3ml;
Găng tay vô trùng;
Kim tiêm 20G.
Hóa chất:
NaCl 0.9%, Albumin;
Cồn 70o, Iod 10%;
Dung dịch lau bàn, dung dịch rửa tay nhanh.
Mẫu bệnh phẩm:
Túi dịch tủy xương sau khi thu thập.
CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Bước 1: Pha loãng dịch tủy xương
Pha dịch tủy xương trong dung dịch albumin đạt nồng độ 1,5% để điều chỉnh hematocrit đạt khoảng 25 – 30%.
Bước 2: Cài đặt các thông số của máy
Bật máy Comtec, chọn chương trình (BMSC);
Lắp bộ kít P1Y theo hướng dẫn của chương trình;
Chạy chương trình tráng kít (priming) bằng NaCl 0,9%;
Cài đặt các thông số;
Kết nối túi chứa dịch tủy xương vào bộ kít P1Y.
Bước 3: Chạy chương trình phân lập tế bào gốc
Bấm start để chạy chương trình;
Máy thực hiện phân lập theo chương trình;
Điều chỉnh các chỉ số để thu nhận sản phẩm tốt nhất: lượng máu vào, lượng thu nhận, thể tích…
Kết thúc quy trình phân lập: trả các thành phần loại bỏ về túi ban đầu.
Bước 4: Kết thúc chạy máy
Dừng máy, khóa các van vào, ra và các túi chứa sản phẩm;
Tháo kít ra khỏi máy và hàn dây tách túi sản phẩm ra khỏi bộ kít;
Tách túi sản phẩm và lấy mẫu để xét nghiệm: tổng phân tích tế bào máu; đếm số lượng tế bào gốc; nuôi cấy cụm.
Bước 5: Hoàn thiện hồ sơ và thu dọn dụng cụ
Hoàn thiện và dán nhãn sản phẩm;
Ghi chép kết quả chương trình gạn tách và thủ tục hành chính.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Fresenius HemoCare. The new Cell Seperator: Comtec. Fresenius Transfusion GmbH, 2011.
Michael L.Linenberger. Collection of cellular therapy products by apheresis. Cellular Therapy: Principle, Method and Regulation, Bethesda, MD: AABB, 2009, chapter 23, p.251 – 277.
