Nguyên tắc
Phương pháp nhuộm nhằm phát hiện chất nhầy từ biểu mô.
Chuẩn bị
Người thực hiện
Kỹ thuật viên giải phẫu bệnh – tế bào bệnh học: 02
Phương tiện, hóa chất
Phương tiện, hóa chất chung
Dung dịch cố định bệnh phẩm.
Cồn (500, 700, 800, 950 , 1000).
Xylen hay toluen.
Nước cất 2 lần.
Parafin.
Sáp ong.
Albumin + glycerin.
Máy đo độ pH điện tử.
Máy chuyển bệnh phẩm tự động.
Máy đúc khối parafin.
Bàn hơ dùng điện.
Máy cắt lát mỏng (microtome).
Lưỡi dao cắt lát mỏng.
Lò nấu parafin.
Tủ ấm 370 và 560.
Tủ lạnh.
Điều hòa nhiệt độ.
Tủ hốt phòng thí nghiệm.
Nguồn cấp nước chảy.
Bể nhuộm bằng thủy tinh.
Bể thủy tinh đựng cồn, xylen.
Hộp bằng thép không rỉ đựng parafin.
Khuôn nhựa.
Giá đựng tiêu bản (đứng và nằm ngang).
Cốc đong loại 1000ml, 500ml, 100ml và 50ml.
Ống hút bằng nhựa, quả bóp cao su hút hóa chất.
Kẹp không mấu, kéo.
Cân phân tích.
Giấy lọc.
Phiến kính, lá kính.
Acid picric ngâm, làm sạch phiến kính.
Bôm Canada hoặc keo gắn lá kính.
Kính hiển vi 2 mắt để kiểm tra kết quả nhuộm.
Kính phòng hộ, găng tay các loại, mặt nạ phẫu thuật, áo choàng phẫu thuật.
Phương tiện, hóa chất riêng biệt cho kỹ thuật
Carmin.
AlCl3
Nước vàng metanil.
Cồn tuyệt đối hoặc dung dịch sublimat 5%.
Các bước tiến hành
Cố định
Bệnh phẩm lấy ra khỏi cơ thể, được cố định ngay trong cồn tuyệt đối hoặc trong dung dịch sublimat 5% trong 5 giờ.
Sau cố định, bệnh phẩm được thực hiện qua các khâu kỹ thuật sau:
Chuyển bệnh phẩm
Vùi parafin
Đúc khối parafin
Cắt và dán mảnh cắt
Nhuộm mảnh cắt
Chuẩn bị phẩm nhuộm mucicarmin
Dung dịch dự trữ
Hòa tan 1g carmin và 0,5g AlCl3 khan trong 2ml nước cất bằng cách hâm nóng nhẹ trong 2 phút, khuấy luôn cho đến khi dung dịch sẫm màu.
Tiếp tục khuấy và cho thêm từ từ 100ml cồn 50°.
Để lắng 24 giờ rồi lọc
Dung dịch dùng
Pha loãng dung dịch dự trữ 10 lần bằng nước cất hoặc tốt hơn là pha loãng bằng cồn 50-70°.
Các bước nhuộm
Loại parafin như thường lệ.
Nhuộm mảnh cắt trong dung dịch mucicarmin pha loãng từ 10-15 phút hay lâu hơn.
Rửa nhanh trong nước cất.
Loại nước bằng cồn 80°, 95°, sau đó là cồn tuyệt đối.
Làm trong bằng xylen.
Gắn lá kính bằng bôm Canada.
Kết quả
Chất nhầy màu đỏ.
