Định lượng triglycerid – dịch chọc dò

ĐỊNH LƯỢNG TRIGLYCERID – DỊCH CHỌC DÒ

 

NGUYÊN LÝ

                       lipase

Triglycerid ————–>  Glycerol + cid béo tự do

                           Glycerol kinase

Glycerol + ATP  ——————–> Glycerol – 3 – phosphat + ADP

                                   Glycerol-3P Oxidase

Glycerol – 3 P + O₂ ——————————->  Dihydroxyaceton – P + H₂O₂

                                                                      Peroxydase                                    

H₂O₂ + 4Chlorophenol + 4Amino antipyrin ——————>  Quinonimine + H₂O

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Bác sĩ hoặc kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên nhành xét nghiệm Hóa sinh

Phương tiện, hóa chất

Máy xét nghiệm bán tự động H5000, 4010, evolution…

Máy tự động hoàn toàn AU 400, 640, 2700 (hãng Beckman coulter).

Kit của hãng Human.

Thuốc thử

R1: BUFFER

Chloro – 4 – phenol

Magnesium Chlorid

 R2: ENZYM

Lipase

Peroxidase

Glycerol – 3 phosphat oxidase

Glycerol kinase

4 – amino – antipyrin

ATP

R3: Standard

Dung dịch Triglycerid chuẩn: 200mg/dL(2.28 mmol/l)

Working solution: R1 + R2, lắc cho tan đều để ổn định 10 phút, bền 30 ngày 4^oC, đựng trong chai nâu.

Người bệnh

Người bệnh cần được giải thích về việc cần làm xét nghiệm.

Phiếu xét nghiệm

Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ các thủ tục hành chính: họ tên người bệnh, tuổi, mã số người bệnh, khoa phòng, tên xét nghiệm chỉ định, khoảng tham chiếu, bác sĩ chỉ định xét nghiệm, ngày giờ lấy mẫu, người lấy mẫu, ngày giờ nhận mẫu bệnh phẩm, người nhận mẫu.

Ghi yêu cầu xét nghiệm: Định lượng nồng độ triglycerid.

CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Lấy bệnh phẩm

Dịch chọc dò cần ly tâm thu lấy dịch trong để định lượng.

Tiến hành kỹ thuật Cho vào 3 ống nghiệm

	Ống trắng	Ống chuẩn	Ống thử
Thuốc thử	1 ml	1 ml	1 ml
Nước cất	10 µl
Triglycerid chuẩn		10 µl
Mẫu thử			10 µl

Lắc đều, ủ 37ºC trong 5 phút hoặc 10 phút ở nhiệt độ phòng. Đo mật độ quang học ở bước sóng = 500 nm (480 – 520 nm) so với ống chuẩn để tính kết quả.

Tính kết quả: Nồng độ ống mẫu.

C_U= OD_U/ OD_S * C_S (mg/dL hoặc mmol/l)

OD_U là mật độ hấp thu của ống mẫu.

OD_S là mật độ hấp thu của ống chuẩn.

C_U là nồng độ Triglycerid mẫu.

C_S là nồng độ Triglycerid chuẩn.

Chú ý: Có thể tiến hành trên máy bán tự động, cài đặt chương trình như trên. Khi làm, đo mật độ quang của ống trắng trước. Sau đó đưa vào ống chuẩn máy sẽ tự động đo và tính ra hệ số. Tiếp đó đưa theo thứ tự các ống thử vào máy sẽ tự động đo và tính ra kết quả hiện trên máy hoặc in ra giấy.

NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Bình thường không có Triglycerid trong dịch chọc dò, khi xuất hiện thường hướng tới hiện tượng vỡ bạch mạch do giun chỉ.

NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ