Peroxidase

ĐỊNH LƯỢNG ACID URIC

 

NGUYÊN LÝ

Acid Uric là sản phẩm chuyển hóa cuối cùng của base có nitơ nhân purin.

Acid Uric máu được định lượng theo phương pháp enzyme so màu.

                                           Uricase 

Uric Acid + 2H₂O + O_{2 ————————>} Allatoin + CO₂ + H₂O₂ 

 

                                                                           Peroxidase

2 H₂O₂ + H⁺ + TOOS^a + 4-aminophenazone ——————–> hợp  chất màu đỏ + 4H₂O

Sản phẩm màu được đo ở bước sóng 546nm.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Bác sỹ hoặc kỹ thuật viên được đào tạo chuyên ngành Hóa sinh

Phương tiện, hóa chất

Máy móc: hệ thống máy sinh hóa

Thuốc thử: sẵn sàng sử dụng.

R 1: buffer, TOOS . . .

R 2: Uricase, POD, 4-AAP. . .

Bảo quản ở 2-8⁰C đến khi hết hạn sử dụng, 8 tuần khi để trên máy phân tích Các loại dung dịch hệ thống khác

Chuẩn, nước muối sinh lý

Control: 2 mức

Vật tư tiêu hao: ống lấy máu, kim tiêm, bông, cồn, găng tay …

Người bệnh: được giải thích trước khi thực hiện XN, tốt nhất là nhịn ăn sáng và lấy máu vào buổi sáng.

Phiếu xét nghiệm: có đầy đủ thông tin về người bệnh bao gồm tên, tuổi, khoa phòng, chẩn đoán, tình trạng mẫu, tên BS chỉ định, các loại thuốc đã sử dụng (nếu có) …

CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Lấy bệnh phẩm: bệnh phẩm phải được lấy đúng kỹ thuật vào ống tiêu chuẩn. Ly tâm trước khi tiến hành kỹ thuật. Có thể sử dụng huyết thanh hoặc huyết tương chống đông bằng heparin. Bảo quản ở 2-8⁰C trong vòng 5 ngày, ở – 20⁰C được 6 tháng. Rã đông một lần.

Để bệnh phẩm, chuẩn, control ở nhiệt độ phòng (20-25⁰C) và lắc đều trước khi tiến hành XN.

Tiến hành kỹ thuật

Máy móc, hóa chất đã được cài đặt và chuẩn trước khi thực hiện phân tích. Control nằm trong miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử của từng công ty. Thông thường chạy control 2 miền: bình thường và bất thường. Đối chiếu với luật về nội kiểm chất lượng nếu đạt thì tiến hành phân tích mẫu.

Đưa bệnh phẩm vào phân tích theo protocol của máy. Khi có kết quả thì phân tích và đối chiếu với phiếu xét nghiệm và trả kết quả.

NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Bình thường:

+ Nam: 202 – 416 mmol/l

+ Nữ: 143 – 399 mmol/l

Acid uric máu tăng trong:

+ Bệnh Goutte

+ Suy thận

+ Nhiễm độc chì, thuỷ ngân

Acid uric máu giảm trong:

+ Bệnh Willson

+ Cơn liệt chu kỳ

+ Xanthin niệu

NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

Nguyên nhân	Sai sót	Xử trí
Bệnh phẩm lấy vào ống chống đông bằng EDT	Làm giảm kết quả khoảng 7%	Không sử dụng loại chất chống đông này
Bệnh phẩm tăng bilirubin, huyết tán, tăng lipid máu, đang sử dụng thuốc	Kết quả ảnh hưởng không rõ
Nồng độ > dải đo (11,9 – 1487 μmol/L)	Sai lệch kết quả. Rất ít gặp	Pha loãng bệnh phẩm