Nội dung

Ureaplasma urealyticum nhuộm huỳnh quang

Mục đích và nguyên lý

Mục đích

Phát hiện nhanh Ureaplasma urealyticum từ bệnh phẩm của người.

Nguyên lý

Nếu trong bệnh phẩm có Ureaplasma urealyticum, vi khuẩn sẽ kết hợp với kháng thể đặc hiệu gắn huỳnh quang. Khi soi dưới kính hiển vi huỳnh quang sẽ thấy hình ảnh vi khuẩn phát sáng màu vàng xanh.

Chuẩn bị

Người thực hiện:

Người thực hiện: Nhân viên xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.

Người nhận định và phê duyệt kết quả: Người thực hiện đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận v  chuyên ngành Vi sinh.

Phương tiện, hóa chất (ví dụ hoặc tương đương)

Trang thiết bị

Tủ an toàn sinh học cấp 2

Kính hiển vi huỳnh quang

Dụng cụ sấy lam (nếu có)

Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

STT

Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao

Đơn vị

1

Lọ lấy bệnh phẩm

lọ

2

Que lấy bệnh phẩm

cái

3

Lam kính

cái

4

Nước muối sinh lý

ml

5

Thuốc nhuộm Ureaplasma urealyticum DFA

ml

6

Bông

kg

7

Cồn 900 (vệ sinh dụng cụ)

ml

8

Đèn cồn

cái

9

Panh

cái

10

Mỏ vịt (to, vừa và nhỏ)

Cái

11

Thùng đựng dung dịch khử khuẩn ngâm mỏ vịt

Cái 

12

Khay đựng bệnh phẩm

cái

13

Hộp vận chuyển bệnh phẩm

cái

14

cái

15

Khẩu trang

cái

16

Găng tay

đôi

17

Găng tay xử lý dụng cụ

đôi

18

Quần áo bảo hộ

bộ

19

Acid ngâm lam

ml

20

Ống nghiệm thủy tinh

ống

21

Bút viết kính

cái

22

Bút bi

cái

23

Bật lửa

cái

24

Sổ lưu kết quả xét nghiệm

tờ

25

Cồn sát trùng tay nhanh

ml

26

Dung dịch xà phòng rửa tay

ml

27

Khăn lau tay

cái

28

Giấy trả kết quả xét nghiệm

tờ

29

Nội kiểm QC (nếu thực hiện) *

 

30

Ngoại kiểm (EQAS) (nếu thực hiện) *

 

 

Ghi chú:

Chi phí nội kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình nội kiểm (QC) là 1/10 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lượng ≥ 10 mẫu cho 1 lần tiến hành kỹ thuật).

Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần/1 năm).

Bệnh phẩm

Mủ hoặc dịch niệu đạo, âm đạo, dịch ngoáy họng.

Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu

            các bứớc tiến hành

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.

Lấy bệnh phẩm

Theo đúng quy định c a chuyên ngành Vi sinh (Xem Phụ lục)

Tiến hành kỹ thuật

Chuẩn bị tiêu bản

Nhuộm ureaplasma urealyticumdfa (direct fluorescent antibody)

Phủ dung dịch nhuộm huỳnh quang lên tiêu bản, để 2 phút

Rửa lại bằng nước để loại bỏ huỳnh quang thừa rồi để khô, soi dưới kính hiển vi huỳnh quang.

Nhận định kết quả

Ureaplasma urealyticum có hình ảnh cầu khuẩn, bắt màu vàng xanh trên nền tím đen dưới kính hiển vi huỳnh quang.

Những sai sót và xử trí

Có thể gây âm tính giả nếu số lượng vi khuẩn quá ít.